NộI Dung
Phân tích phản ứng chuỗi polymerase (PCR) là một kỹ thuật trong phòng thí nghiệm. Mục đích của xét nghiệm PCR là tìm một lượng nhỏ DNA trong một mẫu, sử dụng một quy trình được gọi là khuếch đại. Trong quá trình khuếch đại PCR, DNA quan tâm được sao chép nhiều lần cho đến khi có đủ DNA để phân tích và phát hiện. Ví dụ, PCR có thể được sử dụng để xác định một lượng nhỏ DNA từ các sinh vật gây bệnh lậu hoặc chlamydia có trong mẫu nước tiểu.PCR hoạt động như thế nào?
Bước đầu tiên của PCR là tạo mồi. Đây là những chuỗi DNA ngắn khớp với các đầu của mẫu DNA mà bạn đang cố gắng phát hiện. Chúng là mẹo để tìm, khuếch đại và phát hiện một đoạn DNA cụ thể. Đoạn DNA đó có thể được sử dụng để xác định mầm bệnh. Nó cũng có thể được sử dụng để làm những việc như phát hiện gen kháng thuốc kháng sinh.
Khi bạn đã có các đoạn mồi của mình, bước tiếp theo trong PCR là làm nóng mẫu để DNA sợi kép tách thành hai sợi đơn - đây được gọi là biến tính. Sau đó, sơn lótđược kết hợp với DNA mẫu. Sau đó, một DNA polymerase được sử dụng để bắt đầu sao chép DNA tại vị trí mồi. Cuối cùng, DNA được làm nóng để tách các sợi một lần nữa. Sau đó, toàn bộ quá trình PCR bắt đầu lại.
Số lượng phân đoạn DNA quan tâm có trong mẫu tăng theo cấp số nhân với mỗi chu kỳ PCR. Trong chu kỳ đầu tiên, một bản sao trở thành hai. Sau đó, hai bản sao trở thành bốn, sau đó trở thành tám, v.v. Sự tăng trưởng theo cấp số nhân này có nghĩa là nói chung, chỉ cần 20 đến 40 chu kỳ để xác định xem DNA được đề cập có tồn tại hay không. (Nếu có DNA thì 20-40 chu kỳ cũng đủ cung cấp mẫu đủ để phân tích).
Tất cả các bước của phản ứng chuỗi polymerase-biến tính DNA, áp dụng các đoạn mồi và kéo dài DNA-xảy ra ở các nhiệt độ khác nhau. Điều đó có nghĩa là sau khi hỗn hợp ban đầu được kết hợp với nhau, các bước có thể được kiểm soát thông qua một quy trình được gọi là luân chuyển nhiệt. Thermocycling có nghĩa là nhiệt độ được giữ ở mức cần thiết vừa đủ lâu để mỗi bước diễn ra. Do đó, PCR là một cách hiệu quả để khuếch đại số lượng DNA đích. Trên thực tế, nó có thể được thực hiện trong một ống nghiệm duy nhất mà không cần đến sự can thiệp của con người.
Phản ứng chuỗi polymerase đại diện cho một cuộc cách mạng trong kỹ thuật sinh học khi nó được phát triển lần đầu tiên vào đầu những năm 1980. Người tạo ra PCR, Kary Mullis, đã giành giải Nobel Hóa học cho công trình của mình vào năm 1993.
Tại sao PCR có liên quan đến xét nghiệm STD
Phản ứng chuỗi polymerase và các kỹ thuật liên quan như phản ứng dây chuyền ligase, đang được chứng minh là ngày càng có tầm quan trọng đối với xét nghiệm STD. Điều này là do các kỹ thuật này có thể xác định trực tiếp một lượng nhỏ DNA hoặc RNA của virus trong mẫu. Việc xác định mã di truyền của mầm bệnh không yêu cầu mầm bệnh phải còn sống - không giống như nuôi cấy vi khuẩn hoặc vi rút. Nó cũng không yêu cầu sự lây nhiễm đã xảy ra cách đây đủ lâu để mọi người phát triển một phản ứng kháng thể có thể phát hiện được (cách phát hiện nhiễm trùng bằng ELISA.) Điều này có nghĩa là kỹ thuật PCR đôi khi có thể phát hiện bệnh sớm hơn các xét nghiệm khác. Thậm chí tốt hơn, STDs có thể được phát hiện mà không cần quan tâm nhiều đến việc giữ mẫu còn sống hoặc xét nghiệm vào đúng thời điểm.
Các xét nghiệm STD tại nhà tốt nhất